Comment faire une culture tissulaire?
Pour faire une culture tissulaire, lisez d'abord le protocole du fabricant pour vous assurer que vous transférez correctement l'échantillon de tissu dans l'environnement de culture. Une fois que vous avez transféré le tissu, vous devrez le maintenir à une température et à un pH constants pour éviter qu'il ne meure. Vous devrez également suivre les instructions du fabricant sur l'alimentation de l'échantillon tous les 2 à 3 jours pour vous assurer qu'il continue de croître. De plus, si les cellules deviennent trop denses, elles peuvent cesser de croître, alors essayez de transférer certaines des cellules dans un nouveau plat s'il y a trop de monde. Pour plus de conseils sur la façon de préparer l'environnement de la culture, lisez la suite de notre co-auteur Infirmière!
Pour faire une culture tissulaire, lisez d'abord le protocole du fabricant pour vous assurer que vous transférez correctement l'échantillon de tissu dans l'environnement de culture.
La culture tissulaire est un moyen d'obtenir plus de cellules du tissu en les faisant pousser hors de l'organisme. Pour ce faire, il est nécessaire de mettre en place un environnement artificiel dans lequel les cellules se développeront. Une fois les cellules cultivées, elles peuvent être utilisées dans de nombreux types d'études, y compris des études sur la biochimie des tissus et le développement de médicaments.
Partie 1 sur 2: se préparer à la culture
- 1Déterminez ce que vous allez cultiver. Il est possible de cultiver à la fois des cellules végétales et animales. Parfois, les gens veulent cultiver des tissus qui ont été obtenus directement à partir d'une plante ou d'un animal. D'autres fois, les cellules sont cultivées à partir d'une lignée cellulaire qui a été préalablement cultivée et stockée.
- De nouvelles cultures peuvent être créées à partir du prélèvement de tissu sur un organisme. Ces cellules sont appelées une culture primaire. Ils ne se diviseront que si longtemps avant de passer par la sénescence.
- Une lignée cellulaire continue a été modifiée à l'aide de produits chimiques ou de virus afin que les cellules continuent à se diviser indéfiniment.
- 2Préparez l'environnement culturel. Les conditions seront différentes pour différents types de cellules, mais en général, la culture nécessitera:
- Une température contrôlée. La meilleure température variera selon le type de cellules que vous cultivez, mais elle se situera probablement entre 20 et 45°C.
- Un pH contrôlé. Le meilleur pH se situera probablement entre 6,0 et 7,5.
- Une pression osmotique contrôlée
- Échange adéquat d'oxygène et de dioxyde de carbone
- Les hormones
- Facteurs de croissance
- Un substrat qui fournira aux cellules les nutriments dont elles ont besoin. Cela comprend les acides aminés, les glucides, les vitamines et les minéraux.
- Lumière. La lumière est cruciale si vous cultivez des cellules végétales qui doivent faire la photosynthèse.
- 3Décidez du type de substrat que vous allez fournir. De nombreux types de cellules se développent mieux lorsqu'ils sont attachés à un substrat. Les types de substrats possibles comprennent:
- Un substrat solide, également appelé adhérent. Les tissus obtenus à partir d'organes comme les reins sont généralement adhérents car ils sont fixés dans le tissu conjonctif.
- Un substrat semi-solide ou monocouche. Ces types de cultures forment généralement une couche d'une cellule profonde sur le fond.
- Une culture en suspension. Les cellules de ce type n'ont pas besoin d'être ancrées au substrat et se développeront en flottant à la place. Les cellules du sang sont souvent cultivées en suspension.
La culture tissulaire est un moyen d'obtenir plus de cellules du tissu en les faisant pousser hors de l'organisme.
Partie 2 sur 2: réaliser la culture
- 1Suivez les protocoles du fabricant pour démarrer la culture. Il existe plusieurs sociétés qui fournissent aux laboratoires du matériel et des équipements pour réaliser des cultures. Lorsque vous achetez les matériaux, ils seront également accompagnés de protocoles pour démarrer la culture. Ces protocoles décriront exactement comment vous devez transférer l'échantillon que vous souhaitez mettre en culture dans l'environnement de culture. Plusieurs entreprises bien connues comprennent:
- Qiagen
- Fisher Scientific
- Thermo Scientific
- 2Nourrissez les cellules si vous travaillez avec des cellules de mammifères. Il est généralement nécessaire de reconstituer les milieux de culture tous les 2 à 3 jours. Suivez les protocoles du fabricant pour nourrir les cellules.
- Ce processus devrait prendre 20 minutes ou moins.
- Si vous ne fournissez pas suffisamment de nutriments, les cellules dont vous disposez mourront.
- 3Divisez les cultures qui commencent à devenir encombrées. Afin de maintenir la culture en croissance, vous devrez peut-être déplacer certaines des cellules dans une nouvelle boîte avec une densité plus faible. Cela permettra à la fois à la culture d'origine et à la nouvelle de continuer à grandir.
- Vous pouvez également congeler certaines des cultures pour des travaux futurs ou pour répéter des expériences si vous avez des problèmes de contamination à l'avenir. Suivez les protocoles fournis pour déterminer la température de cryoconservation ou de congélation des cultures.
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Questions et réponses
- Quelles sont les étapes d'une culture tissulaire?Préparation de la culture, réglage des facteurs environnementaux pour la culture, nature du substrat, alimentation des cellules de culture si nécessaire, déplacement des nouvelles cellules de culture dans une autre boîte lorsqu'il y a beaucoup de monde.
- La culture doit-elle être placée au soleil si j'utilise du tissu provenant d'une plante?Il peut être placé au soleil ou à la lumière, sinon la plante ne peut pas subir de photosynthèse et de respiration.
- Pourquoi ai-je besoin d'une culture tissulaire?Dépend. Je suis horticulteur donc j'essaye de cloner des plantes rares et tropicales.
Les commentaires (1)
- Grâce aux images, il est facile de comprendre les méthodes impliquées dans les techniques et les exigences de culture de tissus végétaux.
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